当含有细小颗粒的悬浮液静置不动时,由于重力场的作用使得悬浮的颗粒逐渐下沉。粒子越重,下沉越快,反之密度比液体小的粒子就会上浮。微粒在重力场下移动的速度与微粒的大小、形态和密度有关,并且又与重力场的强度及液体的粘度有关。象红血球大小的颗粒,直径为数微米,就可以在通常重力作用下观察到它们的沉降过程。 此外,物质在介质中沉降时还伴随有扩散现象。扩散是无条件的的。扩散与物质的质量成反比,颗粒越小扩散越严重。而沉降是相对的,有条件的,要受到外力才能运动。沉降与物体重量成正比,颗粒越大沉降越快。对小于几微米的微粒如病毒或蛋白质等,它们在溶液中成胶体或半胶体状态,仅仅利用重力是不可能观察到沉降过程的。因为颗粒越小沉降越慢,而扩散现象则越严重。所以需要利用离心机产生强大的离心力,才能迫使这些微粒克服扩散产生沉降运动。
离心就是利用离心机转子高速旋转产生的强大的离心力,加快液体中颗粒的沉降速度,把样品中不同淇沉降系数和浮力密度的物质分离开。按分离因素Fr值分,可将离心机分为以下几种型式:
1、常速离心机
Fr≤10000(一般为300~8000),这种离心机的转速较低,直径较大。
2、高速离心机
Fr=10000~50000,这种离心机的转速较高,一般转子直径较小,而长度较长。
3、超高速离心机
Fr>50000,由于转速很高(50000r/min以上),所以转鼓做成细长管式。
分离因素Fr是指物料在离心力场中所受的离心力,与物料在重力场中所受到的重力之比值,离心机的选购与管理离心机时应根据工作多方衡量。通常应从下边几个因素考虑:
(1)离心的目的,分析离心还是制备离心。
(2)样品的种类和数量,是细胞、病毒,还是蛋白,样品量的大小。根据这些因素决定购买分析离心机还是制备离心机,是低速、高速还是超速,大容量、常量的还是微量的离心机。
(3)经济能力:当机型确定后就应考虑生产厂家及价格,价格和产品的性能是同步的。
(4)其他细节:如离心操作是否简便,维修是否方便,设计是否已过时,易损件供应是否方便等问题。
(5)配套问题:一台离心机不可能同时在低速,高速和超速条件下运行。一般讲超速离心机只限于超速离心,不宜于做高速离心更不宜于做低速离心,同样高速离心机也不宜于低速离心。因此买超速离心机要考虑配备高速离心机,否则发挥不了优势。一般说低速、高速的使用频率较高,而超速离心机的利用率较低,超速离心机仅经常使用的实验室购置或考虑地区性的公用设置。
离心机的型号确定后,就是选购什么样的离心转头。考虑的主要的根据就是样品的容量及离心的条件。通常有水平转头和角转头各一个,或大容量(相对较低速)的转头和小容量高转速的转头各一个即可满足工作中的不同需要,不可追求越全越好,因为DT5-2B台式低速离心机的转子种类比较多,许多是相似的,而超速机的转头价格相当昂贵,如果全部配齐其价格要比离心机主机高出好几倍,也没有必要。由于转头转速的不同价格相差很大。从转速上讲不宜追求越高越好,但应有离心机允许转速的转头,否则对离心机而言是个浪费。有两台离心机的单位可考虑转头型号互补以节省经费,离心机的管理,从国内多年离心机的使用情况看,各类型离心机应由专人负责管理和维护。高、超速离心机要求定期检查维修,使用者应详细记录实验状态及维修情况,以保证离心机的安全使用。高、低速离心机由于操作简单,通过阅读说明书,训练离心机操作规程后可以自己使用。而超速离心机结构复杂,工作程序也较繁琐,使用不当易发生事故,特别对离心转头更应谨慎保养、使用。从国内多年使用、管理情况来看,由专人保管,是一种让仪器始终处于良好状态的保证。对管理、操作人员应进行培训,使他们不但熟悉操作,而且对仪器也应有所了解。
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